Genomische Bibliothek vs. cDNA-Bibliothek

Autor: Laura McKinney
Erstelldatum: 6 April 2021
Aktualisierungsdatum: 11 Kann 2024
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cDNA library vs Genomic DNA library
Video: cDNA library vs Genomic DNA library

Inhalt

Genomische Bibliothek und cDNA-Bibliothek werden beide beim Klonen von Genen verwendet, um verschiedene DNAs zu isolieren. Der Unterschied zwischen diesen beiden Bibliotheken besteht darin, dass die genomische Bibliothek DNA-Fragmente umfasst, die das gesamte Genom eines Organismus exprimieren, während in der cDNA-Bibliothek mRNA aus bestimmten Zellen eines Organismus entnommen wird und cDNA dann aus dieser mRNA in einer Reaktion besteht, die katalysiert wird durch ein Enzym.


Inhalt: Unterschied zwischen Genomic Library und cDNA Library

  • Vergleichstabelle
  • Was ist die Genomische Bibliothek?
  • Was ist die cDNA-Bibliothek?
  • Hauptunterschiede

Vergleichstabelle

BasisGenomische BibliothekcDNA-Bibliothek
DefinitionEine genomische Bibliothek ist eine Sammlung der gesamten genomischen DNA eines Organismus. DNA wird in einer Population ähnlicher Vektoren gespeichert, die jeweils ein unterschiedliches Insert von DNA enthalten.Eine cDNA-Bibliothek ist eine Mischung aus klonierten cDNA-Fragmenten, die in eine Auswahl von Wirtszellen inseriert wurden und zusammen einen Teil des Transkriptoms des Organismus ausmachen.
AusdruckGesamtes GenomNur bestimmte Gene.
GrößeGrößerKleiner
IntronsStromAbwesend
VektorEs verwendet Plasmide, Cosmide, Lambda-Phagen, YAC und BAC zur Akkommodation großer Fragmente.Es gibt keine Introns, daher werden Plasmide, Phagemide und Lambda-Phagen verwendet, um bescheidene Fragmente aufzunehmen.

Was ist die Genomische Bibliothek?

Beim Gen-Klonierungsverfahren wird das interessierende Gen aus einer von einem Organismus getrennten DNA kopiert. Wenn DNA von einem Organismus getrennt wird, sind seine Gene auf einmal extrahiert worden. Die DNA des Organismus besteht aus Tausenden verschiedener Gene. Der Gentechniker findet ein bestimmtes Gen, das für das jeweilige Protein von Interesse kodiert.


Es gibt absolut keine Methode, mit der ein bestimmtes Gen aus der DNA verfügbar ist. Wissenschaftler erstellen daher Genbibliotheken, um die DNA des Organismus zu katalogisieren. Wissenschaftler wählen dann das gewünschte Gen in der Bibliothek aus. Die Genbibliothek ist eine Gruppe lebender Bakterienkolonien, die im Organismus, aus dem das gewünschte Gen stammt, mit einzigartigen DNA-Stücken transformiert wurden. DNA wird aus einem Organismus extrahiert, um eine Bibliothek zu erstellen, die eine organisierte Form von DNA ist. Genombibliothek und cDNA sind zwei Arten von Genbibliotheken. Zahlreiche Techniken zum Klonen von Genen wurden als Genstrategien in der Rekombinationstechnologie verwendet.

Die DNA-Fragmente werden durch Schneiden mit spezifischen Restriktionsenzymen von der Eltern-DNA getrennt. Diese Fragmente werden an Vektormoleküle ligiert und die angesammelten Moleküle werden in Wirtszellen gebracht, 1 Molekül in jeder Zelle. Die Genombibliothek besteht aus Introns, Junk-DNA und einer Reihe anderer Fragmente. Innerhalb dieser Bibliothek wird die DNA in einer Zelle in kleinere Fragmente zerlegt. Anschließend werden alle kleinen Teile in einen Vektor eingefügt, um eine Bibliothek zu erstellen. Die Genombibliothek umfasst die gesamte DNA der gesamten Gene und die Zelle besteht aus all ihren Introns. Genomische DNA ist die Übersetzung des gesamten Genoms. Aufgrund der Größe der Introns wird nicht der gesamte Teil auf einem Codon codiert. In einer Genombibliothek gibt es keinen Spleißmechanismus, der die Expression von Genen aus dieser Bibliothek erschwert.


Was ist die cDNA-Bibliothek?

Die cDNA-Bibliothek wird durch Auswahl eines Gewebe- oder Zelltyps konstruiert. Anschließend wird mRNA aus diesem Gewebe oder dieser Zelle isoliert. Eine DNA-Kopie des mRNA-Moleküls besteht aus einem spezifischen Enzym der reversen Transkriptase. Die cDNA-Bibliothek enthält also die spezifische DNA, die in der mRNA vorhanden ist. In dieser Bibliothek werden keine Introns und keine DNA-Sequenz gefunden. In dieser Bibliothek sind alle Klone in voller Länge. Darüber hinaus ist ein cDNA-Klon für die Transfektion von Zellen zur Proteinproduktion oder für zellbasierte Assays unerlässlich.

Hauptunterschiede

  1. Die genomische Bibliothek wurde direkt aus der genomischen DNA geschrieben.
  2. Die cDNA-Bibliothek wurde unter Verwendung von mRNA als Matrize gebildet.
  3. Die Genombibliothek belegt das gesamte Genom dieses Organismus.
  4. Die cDNA-Bibliothek repräsentiert nur Gene mit bestimmten Beschwerden.
  5. Zwei Enzyme, Restriktionsendonukleasen und Ligasen sind wichtig für den Aufbau der Genombibliothek.
  6. Das reverse Transkriptaseenzym spielt eine signifikante Rolle bei der Konstruktion der cDNA-Bibliothek.
  7. Die Genombibliothek besetzt die DNA sowohl prokaryotischer als auch eukaryotischer Organismen.
  8. Die cDNA-Bibliothek repräsentiert die DNA von nur eukaryotischen Organismen.
  9. Die cDNA-Bibliothek ist zur Genomexpression in Bakterien fähig, die prokaryotisch sind, da ihnen Introns fehlen.
  10. Eine Genombibliothek kann im prokaryotischen Organismus nichts aussagen, da sie Introns besitzt und der prokaryotische Organismus keine Maschinen zur Verarbeitung von Introns besitzt.